檢查待測物對細胞的毒性試驗有體內和體外實驗之分。體外試驗是檢查待測物對培養細胞的影響，方法是將一定量待測物作用于體外培養細胞，再通過觀察或測定細胞增殖、存活率、形態改變、DNA合成及遺傳性狀等變化對細胞的毒性作用。
(一)化學物質的一般毒性檢測
要了解化學物質對培養細胞一般生物學性狀的毒性作用，首先將不同稀釋度的待測化學物質加至一定數量的培養細胞中，培養一定時間后，觀察細胞形態、存活率、增殖情況及DNA合成情況。該方法簡單易行。例如測定DNA抑制劑或RNA抑制劑的作用時。可采用該方法。
(二)培養細胞染色體畸變分析
體外培養的細胞受到化學致突變物的作用，其染色體可發生結構或數目的改變，根據染色體畸變頻率的高低及畸變類型來判斷待測物的致突變性。方法是在體外培養的哺乳動物細胞(如CHL細胞)中加入不同劑量待測物一定時間后，加入秋水仙素以抑制細胞分裂時紡錘體形成，增加中期分裂象細胞數，顯微鏡下觀察分析染色體畸變細胞數及畸變類型。
(三)哺乳動物培養細胞基因突變試驗
哺乳動物培養細胞基因突變試驗是利用嘌呤類似物選擇突變細胞的試驗。其原理是次黃嘌呤鳥嘌呤磷酸核糖基轉移酶(HGPRT)是HGPRT位點的表達產物。該酶是細胞內嘌呤核苷酸生物合成的補救途徑，如果該酶失活則不引起細胞致死；但當培養基中含有嘌呤類似物(如6一硫基嘌呤、6-硫代鳥嘌呤、8-氮鳥嘌呤)時，該酶能以這些類似物為底物，生成有毒性的核苷一5一單磷酸，此物質摻人到DNA中則能引起細胞死亡。但如果細胞HGPRT位點發生突變時，細胞對這些嘌呤類似物具有抗性，仍能在含有嘌呤類似物的培養基中生長，故利用此試驗能選擇突變細胞。主要方法是將一定數量哺乳細胞(如V79)接種于培養皿中，培養24h后，加入一定濃度致突變待測物作用一定時間，再接種含有嘌呤類似物的培養基中培養7天后固定染色，計數每皿中細胞形成集落，與對照相比，計算出待測物各濃度組的相對集落形成率，算出突變率。
© 2025 上海莼試生物技術有限公司版權所有 
滬ICP備17029297號-5 管理登陸 技術支持：化工儀器網 GoogleSitemap
