介紹一種質粒轉化大腸桿菌時免熱激及孵育的方法。
背景：目前外源質粒轉化大腸桿菌的步驟，需要先將質粒和感受態細胞在冰上撫育半小時，然后42度熱激90秒，加液體培養基緩搖1個小時左右再離心涂板。其中熱激步驟溫度和時間要求嚴格，熱激后大量菌細胞死亡，還要經過液體培養基撫育才能涂板。
方法改進：我們可以在做質粒和感受態細胞在冰上撫育的同時，將要涂的平板放在37度培養箱里，當撫育結束后，立即涂到已經加熱到37度的平板上，利用培養板的熱度代替熱激，平板可以直接放回培養箱倒置培養。由于溫度相對溫和，細胞死亡的少，之后的液體培養基撫育過程也省掉了。
這個方法我們一直在用，質粒可以成功轉進菌體中，只要感受態細胞沒有問題，其轉化率和使用熱激法差不多，而且若是新鮮制備的感受態細胞，轉化率甚至更高。可以省下42度水浴裝置的儀器，還節省了至少1個小時的時間。
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